产品描述
产品参数
英文名称
Alkaline Phosphatse （high activity）
缩写
ALP
货号
AA0073B
规格
规格可定制
对硝基苯磷酸二钠 + H2O —————→ 对硝基苯酚 + NaH2PO4
一、 产品介绍
| 外 观： | 无色或浅红色溶液 |
| 蛋白比活： | ≥2000U/mg protein。建议作为 ALP 质控品或校准品，适合标记抗体。 |
| 纯 度： | ≥95% by SDS-PAGE。 |
| 稳 定 性： | 2-8℃至少稳定 2 年，避免冻融。含 PBS 和 BSA 的冻干稳定。 |
| 分 子 量： | ~56kD |
| 等 电 点： | 4.62 左右 |
| 抑 制 剂： | EDTA 、 EGTA 等。 |
| 激 活 剂： | 0.1mM CoCl2 |
| 缓 冲 液： | 50mM PB-K， 1mM MgCl2， 0.1mM CoCl2， 0.1%NaN3， pH7.5。 |
| pH 稳定性： | 6.5-11.5（25℃， 24h） |
| 最 适 pH： | 11.0-11.2 |
| 最适温度： | 20℃-60℃活力随温度升高逐渐升高； 37℃测值为 25℃测值的 3.3 倍。 |
| 热稳定性： | 45℃以下稳定； 60℃ 加热30min后活力依然保留50%以上； 70℃ 以上失活。 |
二、 酶活检测方法
1. 原理
ALP 催化无色的对硝基苯磷酸二钠水解生成淡黄色的对硝基苯酚，后者在 405nm 处有特征吸收峰。
通过测定 OD405的变化速率计算 ALP 的活性。 1 个酶活单位等于在下述反应条件下每分钟生成 1umol
对硝基苯酚所需的酶量。
2. 测活试剂
测活试剂为北京利德曼生化股份有限公司碱性磷酸酶测定试剂盒 (AMP 缓冲液， SFBC 速率法)。
R1：试剂盒中反应缓冲液(1M AMP， 0.5mM MgCl2， pH10.2)；
R2：试剂盒中的反应底物（10mM pNpp）；
样品稀释液： 30mM TEA(三乙醇胺)， 1mM MgCl2， 0.1mM CoCl2， 5mg/ml BAS， 0.1%NaN3， pH7.6，
2-8℃保存。
3. 检测步骤：参考碱性磷酸酶试剂盒说明书
R1 1000ul
S 20ul
R2 200ul
R1+S+R2 混匀后，于 37℃温育 60sec，测量之后 120sec 内 OD405的变化速率。
4. 检测参数：
| 反应类型 | SFBS 速率法 | 波长 | 405nm 或 410nm |
| 反应方向 | 升反应 | R1:S:R2 | 1000:20:200 |
| F 值 | 3298 | 线性范围 | 0~600U/L |
三、 酶性质
关键词
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碱性磷酸酶（低比活）
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