一、产品介绍
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外观： |
白色微黄无定形粉末 |
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比 活 性： |
≥25U/mg |
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稳 定 性： |
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分 子 量： |
大约26KD （SDS-PAGE） |
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等 电 点： |
5.3 |
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抑 制 剂： |
不受叠氮钠的抑制 |
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pH稳定性： |
6.0～10.0 (Fig 3.1) |
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最 适 pH： |
10 (Fig 3.2) |
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最适温度： |
55℃ (Fig 3.3) |
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热稳定性： |
50℃ (Fig 3.4) |
二、酶活测定方法
1. 原理
2. 酶活定义
1个酶活单位等于在25度、pH为8.9条件下每分钟转换1微摩尔雄酮的酶量。
3. 检测方法
3.1 样品稀释液的配制：
3.2 酶活检测试剂配制方法
试剂A：取10水焦磷酸钠
试剂B：
试剂C：雄酮30mg溶于100ml 无水甲醇中溶解。
3.3待测样品的配制
检测前用卧氏称量管称量所需酶，酶称量时，应至少称量10mg的酶，以保证称量的准确性。用酶稀释液溶解，定容到配制体积。根据理论酶活，用样品稀释液将样品储备液稀释至40-200 U/L
3.4 酶活检测步骤
将试剂降温到25度以下（可用水或冰水浴）。 依次取2.6 ml试剂A、0.2 ml试剂B、0.1ml待测酶液混合，在25度保温至平衡（25度），加入0.1ml试剂C并开始计时。在340nm条件下，测定第30-70秒的吸光度的变化率。根据活力计算公式得出酶活。此法测定酶活线性在40-200U/L。
3.5 酶活力计算
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Vt |
：反应液总体积 （ml） |
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ε |
：NADH摩尔吸光系数 6.22 （cm2/micromole） |
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Vs |
：待测酶液的体积 （ml） |
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d |
：比色杯光径 (cm) |
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D |
：稀释倍数 |
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△A/min |
：△A/min（待检样品） －△A/min（空白）（单位：ABS/min） |
三. 附图
IVD原料