一、产品介绍
外观: |
白色无定形粉末 |
比 活 性: |
≥1.5U/mg |
稳 定 性: |
|
分 子 量: |
64KD |
等 电 点: |
5.2 |
米氏常数: |
Palmitic acid:1.1×10
CoA:3.2×10 |
抑 制 剂: |
不受叠氮钠的抑制 |
pH稳定性: |
6.5~7.5 (Fig. 1) |
最 适 pH: |
8.0 (Fig. 2) |
最适温度: |
|
热稳定性: |
|
二、酶活测定方法
1. 检测原理
2. 酶活定义
1个酶活单位等于在以下检测条件下1分钟内转化1微摩尔棕榈酸所需要的酶量。
3. 检测方法
3.1 酶活检测试剂配制方法
配制
在
在
在
在80ml试剂A中加入2克苯酚,用试剂A定容到100ml。(可按比例配制)
ACS稀释液:在
ACOD稀释液:在
用试剂G配制240kU/L的ACOD(乙酰辅酶A氧化酶)酶液。
3.2 待测样品的配制
检测前用卧氏称量管称量所需酶,酶称量时,应至少称量10毫克的酶,以保证称量的准确性。用酶稀释液(试剂F)溶解,定容到配制体积。
1、320μl试剂B与80μl试剂C在
2、加入20μl稀释好的ACS酶液,
3、加入800μl试剂D、20μl试剂E,
4、重复第1、2、3步骤,用20微升的ACS稀释液代替ACS酶液。记录空白吸光值(Ab)。
注意:△A=As-Ab≤0.300;此法酶的最适线性为100-200 U /L。
酶活力(U/L)= △A/min×Vt× D×1000 =△A/min×1050×D
0.5×ε×Vs×d
ε |
:生成的醌亚胺在500nm的消光系数(12) |
Vt
1/2 |
:反应液的总体积(1.26ml)
: |
d |
:比色杯光径( |
D
△A |
:稀释倍数
:As-Ab |
酶比活力(U/mg)=
三. 附图
IVD原料