谷氨酸脱氢酶≥ 100U/mg
一、产品介绍
外观: |
白色微黄的无定形粉末 |
比 活 性: |
≥150U/mg |
稳 定 性: |
|
分 子 量: |
大约50KD |
等 电 点: |
5.92 |
米氏常数: |
10.4×10-3 mol/L(以NN4Cl为底物);7.42×10-3 mol/L(以α-酮戊二酸为底物);
6.65×10-4 mol/L(以NADH为底物) |
抑 制 剂: |
不受叠氮钠的抑制 |
pH稳定性: |
5.0~10.0 (Fig.3-1) |
最 适 pH: |
7.0~8.0 (Fig.3-2) |
最适温度: |
|
热稳定性: |
|
二、酶活测定方法
1. 原理
2. 酶活定义
1个酶活单位等于在以下反应条件下1分钟消耗1微摩尔NADH的酶量,为1单位。
3. 检测方法
3.1 样品稀释液的配制
在800毫升去离子水中,加入
3.2 酶活检测试剂配制方法
3.2.1试剂1的配制
在800毫升去离子水中加入
在800毫升去离子水中,加入
检测前用卧氏称量管称量所需酶,酶称量时,应至少称量10mg的酶,以保证称量的准确性。用样品稀释液溶解,定容到配制体积。此稀释液需在稀释后120分钟内测定完成。
按比例依次加入以下试剂:0.9ml的试剂1,0.18ml的试剂2,
0.015ml,在340nm测定1分钟内吸光度的变化率。此法酶的线性为(100-1000)U/L,建议检测时用(100-500)U/L之间的标本进行检测。
酶活力(U/L)= △A/min×Vt× D×1000 =△A/min×11736×D
ε×Vs×d
Vt |
:反应液总体积 (1.095ml) |
ε |
:摩尔吸光系数 6.22(cm2/micromole) |
Vs |
:待测酶液的体积 (0.015ml) |
d |
:比色杯光径 ( |
D |
:稀释倍数 |
△A/min |
:△A/min(待检样品) -△A/min(空白)(单位:ABS/min) |
三. 附图
IVD原料