谷氨酸脱氢酶≥ 100U/mg

一、产品介绍

二、酶活测定方法

1. 原理  

 2.  酶活定义

1个酶活单位等于在以下反应条件下1分钟消耗1微摩尔NADH的酶量，为1单位。

3. 检测方法

3.1  样品稀释液的配制

在800毫升去离子水中，加入30克Tris搅拌溶解，用盐酸调节pH到7.80，加0.74克EDTA·2Na、1克牛血清白蛋白、1克叠氮钠、4.0克TritonX-100，搅拌溶解，用盐酸调节pH到7.80（25℃），定容到1升。2-8度保存。

3.2  酶活检测试剂配制方法

3.2.1试剂1的配制

在800毫升去离子水中加入6.06克Tris搅拌溶解，用盐酸调节pH到8.45，加5.349克氯化铵、1.00 克叠氮钠，用盐酸调节pH到8.30±0.05（25℃），加0.70克α-酮戊二酸，搅拌溶解，定容至1升，再次确认pH并用盐酸微调节到8.30±0.05，2-8度保存。

3.2.2试剂2的配制

在800毫升去离子水中，加入21.1克CAPS搅拌，用氢氧化钾调节pH到9.6±0.1，加1.0克牛血清白蛋白、2.0克叠氮钠搅拌溶解，溶液冷却到2-8℃，加1.4克NADH搅拌溶解，加水到1升，用氢氧化钾或盐酸调pH到9.6±0.1，2-8度保存。

3.2.3待测样品的配制

检测前用卧氏称量管称量所需酶，酶称量时，应至少称量10mg的酶，以保证称量的准确性。用样品稀释液溶解，定容到配制体积。此稀释液需在稀释后120分钟内测定完成。

3.2.5 酶活检测步骤

按比例依次加入以下试剂：0.9ml的试剂1，0.18ml的试剂2，37℃预热60秒，4分钟后加待测酶液

0.015ml，在340nm测定1分钟内吸光度的变化率。此法酶的线性为（100-1000）U/L，建议检测时用（100-500）U/L之间的标本进行检测。

3.2.6 酶活力计算公式

酶活力（U/L）=  △A/min×Vt× D×1000  =△A/min×11736×D

ε×Vs×d

 三. 附图