搜索
中文名称

嘌呤核苷磷酸化酶

腺苷脱氨酶和5·核苷酸酶生化试剂盒原料AdenosineDeaminaseAssayKitand5·NucleotidaseAssayKitMaterial
所属分类
数量
-
+
没有此类产品
我要询价
产品描述
产品参数
英文名称
Purine Nucleoside Phosphorylase
缩写
PNP
货号
AA0034B
规格
规格可定制

 

一、产品介绍

外观:

白色微黄的无定形粉末

比 活 性:

≥15.0U/mg

稳 定 性:

-20至少稳定一年

分 子 量:

大约29KD

等 电 点:

5.32

米氏常数:

6.4×10-5M (Inosine), 3.2×10-4M (Pi)

抑 制 剂:

不受叠氮钠的抑制

pH稳定性

510            (Fig. 3-1)

最 适 pH

6.0             Fig. 3-2

最适温度:

大于45       Fig. 3-3

热稳定性:

70以下稳定   Fig. 3-4

二、酶活测定方法

 

1.     原理

2. 酶活定义

1个酶活单位等于在以下反应条件下1分钟生成1微摩尔过氧化氢所用的酶量。

3. 检测方法

3.1  样品稀释液的配制

800毫升去离子水中,加入13.6磷酸二氢钾搅拌溶解、用氢氧化钾溶液调节pH7.5025℃),加0.744EDTA.2Na搅拌溶解,加胆酸钠0.14搅拌溶解,加叠氮钠1溶解,用氢氧化钾调节pH7.5025℃),定容至1

3.2酶活检测试剂配制方法

3.2.1试剂1的配制

800毫升去离子水中,加入13.6磷酸二氢钾,0.744EDTA·2Na搅拌溶解,用氢氧化钾调节pH=7.5025℃),加入0.14胆酸钠搅拌溶解,加0.244-氨基安替吡啉搅拌溶解,调节pH7.50±0.0525℃),加4KU的黄嘌呤氧化酶搅拌溶解,加1叠氮钠搅拌溶解,定容到1,再次测量并调节使得pH=7.50±0.0525℃)。

3.2.2试剂2的配制

800毫升去离子水中,加入7.8二水磷酸二氢钠、11.4磷酸氢二钾搅拌溶解, 调节pH=7.725℃),加入3.22次黄苷搅拌溶解,加2.8苯酚、1叠氮钠搅拌溶解,调节pH7.70±0.0525℃)。称过氧化物酶10kU搅拌溶解,定容到1,测定并微调节pH=7.70±0.0525℃

3. 2.3待测样品的配制

检测前用卧氏称量管称量所需酶,酶称量时,应至少称量10mg的酶,以保证称量的准确性。用酶稀释液溶解,定容到配制体积。酶样本溶液在室温稳定1.5小时后在2小时内完成测定。

3.3 酶活检测步骤

按照比例加入下列试剂:0.75ml试剂10.15ml的试剂237预热300秒,加入0.015ml待检样品迅速搅拌均匀。在505nm测定1分钟内吸光度的变化率。建议检测时用200-300U/L之间的标本进行检测。

3.4 酶活力计算公式

 

酶活力(U/LA/min×Vt× D×1000  =A/min×4586×D

ε×Vs×d

Vt

:反应液总体积 ml   0.915ml

ε

:摩尔吸光系数 13.3 cm2/micromole

Vs

:待测酶液的体积 ml

d

:比色杯光径 cm

D

:稀释倍数

A/min

A/min(待检样品) A/min(空白)(单位:ABS/min

 . 附图

未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加
暂未实现,敬请期待
暂未实现,敬请期待
关键词
上一篇
下一篇

IVD原料